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首页高考知识点生物知识点25.生物技术在食品加工及其他方面的应用PCR技术及应用

高考生物知识点

PCR技术及应用

绩优堂高考知识点PCR技术及应用

考点

传统发酵技术的应用植物有效成分的提取DNA与蛋白质的提取与分离PCR技术及应用

共计5道相关试题精选知识点题

【正确答案】
(1)洋葱(菜花等)    洗涤剂和食盐       (2)使溶解   使(溶解度下降而沉淀)析出            (3)       (4)在沸水浴条件下,遇二苯胺会被染成蓝色
创建者: 绩优堂 贡献者: 绩优堂
【正确答案】
答案 (1)

 

(2)      

   

(3)每个 分子各有一条链含      

(4) 解旋    热变性

(5)蛋白酶

【答案详解】

解析    (1) 聚合酶不能从头开始合成 ,只能从 端延伸 链,所以引物就提供了 端,子链延伸方向为 ,引物Ⅰ与 链部分碱基互补,引物Ⅱ则与 链部分碱基互补,且连接到 链的 端,故引物Ⅱ的结构为 。(2)经过一次循环后,产生的两个 分子分别含有引物Ⅰ和引物Ⅱ。(3)由于作为原料的四种脱氧核苷酸被 标记,所以新合成的子链均含有放射性,一次循环后的两个 各有一条链含 ,若复制 次,共产生子链 条;其中只有2条 母链不含 ,则其所占比例为 。(4) 复制是以两条母链为模板,按照碱基互补配对原则进行的。因此,首先要解旋,使两条母链碱基暴露出来,才能按照碱基互补配对的原则把相应的核苷酸一个个地连接起来。 分子在 的温度范围内变性,双链解开成单链,当温度慢慢降低时,又能重新结合形成双链。(5)本题考查了 中杂质蛋白质的去除,利用酶的专一性,应加入蛋白酶。

创建者: 绩优堂 贡献者: 绩优堂
【正确答案】
答案 (1)用解旋酶(或 高温)处理待测 片段    磷酸二酯

(2)缓冲液    (本身)大小    迁移速度

(3)3

(4)一    放射性同位素标记

【答案详解】

解析    (1) 高温处理或用解旋酶处理待测 片段可获得 单链。只有破坏脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键才可把 分子单链断开。(2)电泳利用了不同分子的带电性质,以及分子本身大小、形状的不同,使不同分子在电场作用下产生不同的迁移速度,从而实现样品中各分子的分离。(3)按上图模式每操作1次,能够测出一条链中1种碱基的位置, 分子中有4种碱基,操作3次就能测出 一条链上3种碱基的位置,空位自然是第4种碱基。再根据碱基互补配对原则,可推知 片段上另一条链的碱基顺序。所以从理论上讲,只要按上图模式操作3次,就能测定一段双链 中的全部碱基顺序。(4)基因探针的制作原理是取某基因的一条链,并作放射性同位素标记。

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【正确答案】
(1)碳源;显微镜直接计数   (2)压榨;萃取(注:两空可颠倒)   (3)固定化酶 (4)(   )  聚合酶;  (低温)复性(或退火);   (中温)延伸
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(15分)花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病,野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。

用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化,并丧失再生能力。再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合,以获得抗黑腐病杂种植株。流程如下图。

据图回答下列问题:

(1)过程①所需的酶是                                          。

(2)过程②后,在显微镜下观察融合的活细胞中有供体的               存在,这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志。

(3)原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压,其作用是            。原生质体经过              再生,进而分裂和脱分化形成愈伤组织。

(4)若分析再生植株的染色体变异类型,应剪取再生植株和                   植株的根尖,通过            、            、染色和制片等过程制成装片,然后在显微镜下观察比较染色体的形态和数目。

(5)采用特异性引物对花椰菜和黑芥基因组DNA进行PCR扩增,得到两亲本的差异性条带,可用于杂种植株的鉴定。下图是用该引物对双亲及再生植株1~4进行PCR 扩增的结果。据图判断,再生植株1~4中一定是杂种植株的有                  

(6)对杂种植株进行                 接种实验,可筛选出具有高抗性的杂种植株。

【正确答案】

(1)纤维素酶和果胶酶

(2)叶绿体

(3)保持原生质体完整性  细胞壁

(4)双亲(或花椰菜和黑芥)  解离  漂洗

(5)1、2、4

(6)黑腐病菌

【命题立意】

本题主要考查植物体细胞杂交、染色体变异、PCR技术等知识,属于考纲理解、运用层次,难度较大。

【解题思路】

(1)因植物细胞具有细胞壁结构,其战分主要是纤维素和果胶,故植物体细胞杂交时,需要利用纤维素酶和果胶酶处理,以获得原生质体。(2)图中原生质体融合选用的是供体的叶肉细胞(含有叶绿体)和受体的根尖细胞(不含叶绿体),故可以通过观察融合细胞中供体细胞叶绿体的存在与否,作为初步筛选杂种细胞的标志。(3)植物细胞去除细胞壁后,获得的原生质体容易在培养液中吸水涨破,故需要加入适宜浓度的甘露醇溶液,保持一定的渗透压,维持原生质体的形态和结构的稳定性,以保持原生质体完整;植物体细胞杂交成功的标志是形成新的细胞壁,这是因为细胞壁再生后,植物细胞才能进行正常的分裂和脱分化以形成愈伤组织。(4)可以选取花椰菜、黑芥的根尖与再生植株的根尖,通过解离、漂洗、染色、制片的步骤,观察并比较各细胞中的染色体的数目和形态,即可确定再生植株的染色体变异类型。(5)图示扩增结果中,植株3只含有花椰菜的DNA片段,而植株1、2、4均同时含有花椰菜和黑芥的DNA片段,故1、2、4是杂种植株。(6)对杂种植株接种黑腐病菌,即可筛选出具有高抗性的杂种植株。

创建者: 绩优堂 贡献者: 绩优堂

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